Kierunki i możliwości modyfikacji metod kriokonserwacji oraz oceny jakości nasienia knura

Monika Trzcińska Magdalena Bryła
Rok: 2020ISBN: 978-83-7607-337-8
Pobierz

Spis treści

  1. Wykaz skrótów5
  2. Wprowadzenie9
    1. Kriogenika9
    2. Wykorzystanie kriogeniki w zachowaniu bioróżnorodności zwierząt10
    3. Kriokonserwacja materiału biologicznego13
      1. Kriokonserwacja oocytów i zarodków świni14
      2. Kriokonserwacja nasienia knura17
    4. Technologia kriokonserwacji nasienia knura18
      1. Podstawowy skład rozcieńczalnika mrożeniowego nasienia knura20
    5. Ocena podstawowych parametrów jakości nasienia21
    6. Proces apoptozy24
      1. Zmiany apoptotyczne w gonadach i gametach męskich oraz wybrane metody oceny28
    7. System antyoksydacyjny w nasieniu32
    8. Związki antyoksydacyjne i osłaniające oraz nowe rozwiązania technologiczne w kriokonserwacji nasienia knura33
  3. Cel badań36
  4. Materiał i metody37
    1. Doświadczenie 1: Opracowanie składu rozcieńczalnika mrożeniowego w oparciu o dodatek wybranych antyoksydantów i związków osłaniających37
      1. Przygotowanie rozcieńczalników38
      2. Ocena jakości nasienia45
        1. Komputerowo wspomagana analiza nasienia (CASA) z wykorzystaniem analizatora45
        2. Ocena morfologii plemników46
        3. Ocena integralności akrosomu46
        4. Ocena zmian w przepuszczalności błony komórkowej plemnikówprzy zastosowaniu fluorochromu YO-PRO-1 i jodku propydyny47
        5. Identyfikacja reszt fosfatydyloseryny na powierzchni błony komórkowej plemników przy zastosowaniu aneksyny V-FITC i jodku propydyny47
        6. Ocena fragmentacji DNA plemników przy pomocy metody TUNEL47
        7. Ocena mitochondrialnego potencjału transbłonowego plemników48
    2. Doświadczenie 2: Ocena in vivo zdolności zapładniającej kriokonserwowanego nasienia knura48
      1. Synchronizacja cyklu płciowego loszek49
      2. Przygotowanie loszek do zabiegu domacicznej inseminacji49
  5. Analiza statystyczna53
  6. Wyniki53
    1. Doświadczenie 1: Opracowanie składu rozcieńczalnika mrożeniowego w oparciu o dodatek wybranych antyoksydantów i związków osłaniających53
      1. Ocena jakości nasienia świeżego53
      2. Ocena jakości nasienia kriokonserwowanego z dodatkiem wybranych antyoksydantów oraz substancji osłaniających błony komórkowe plemników55
    2. Doświadczenie 2: Ocena in vivo zdolności zapładniającej kriokonserwowanego nasienia knura60
      1. Selekcja rozcieńczalników mrożeniowych60
      2. Ocena kriokonserwowanego nasienia użytego do inseminacji loszek61
      3. Skuteczność unasieniania loszek nasieniem kriokonserwowa-nym w zmodyfikowanych rozcieńczalnikach61
  7. Omówienie wyników64
  8. Wnioski67